Innehåll
- Antibiotika och hur de fungerar
- Antibiotikaresistentestning
- Kirby-Bauer-testet
- Hur man mäter inhibitionszonen
Bakterier är några av de vanligaste organismerna på jorden. Forskare uppskattar att det är över en biljon olika arter av bakterier, uppgår till över fem miljoner biljoner biljoner (ja, det är två separata biljoner) individer på planeten.
Men av alla dessa bakterier mindre än 1 procent orsaka sjukdom hos människor. Dessa sjukdomar kan sträcka sig från magbesvär, som du kan få från en mild infektion, till allvarliga och dödliga sjukdomar som bubonpesten (orsakad av Yersinia pestis bakterier) som dödade 50 miljoner människor under 1300-talet.
Det är därför upptäckten av antibiotika, som är mediciner som eliminerar bakterier, har räddat så många liv. Problemet med bakterier är att de anpassas och utvecklas mycket snabbt, vilket leder till att antibiotikaresistenta bakteriestammar blir allt vanligare. Mätning av hämningszon för en bakteriestam kan berätta för forskare och läkare om den är resistent mot ett antibiotikum.
Antibiotika och hur de fungerar
Antibiotika är mediciner som dödar bakterier. De fungerar genom att rikta in sig och resultera i död av bakterieceller medan de lämnar dina mänskliga celler ensamma. Varje antibiotikum fungerar på något annorlunda sätt genom att rikta in sig på bakteriespecifika strukturer och signalera för att eliminera dem.
Till exempel stör penicillin (ett av de mest kända antibiotika) bakteriecellväggarna, vilket leder till att de inte fungerar korrekt och därmed dör. Mediciner som fungerar så här kallas beta-laktamantibiotika.
Makrolidantibiotika mål bakteriella ribosomer. Detta förhindrar bakterier från att syntetisera proteiner, vilket innebär att bakterierna inte kan överleva. Ett vanligt exempel är erytromycin, ett antibiotikum som används för att behandla olika infektioner inklusive bronkit och ett antal hudinfektioner.
Kinolonantibiotika är en annan vanlig typ av antibiotika som fungerar genom att störa bakterie-DNA.
Antibiotikaresistentestning
Efter den första upptäckten av antibiotika på 1920-talet insåg forskare snabbt att bakterier utvecklades för att vara resistenta mot medicinerna. Många forskare försökte sedan skapa metoder som gjorde det möjligt för dem att testa hur mottagliga bakteriestammar var för antibiotika för att förstå vad de hade att göra med, så att säga.
De initiala testerna omfattade seriella utspädningar av bakteriell buljong spridda på plattor med olika koncentrationer av antibiotika för att bestämma känsligheten. Denna metod tog dock lång tid.
Kirby-Bauer-testet
Det är där Kirby-Bauer test kommer in. Denna metod standardiserades av mikrobiologer W. M. M. Kirby och A. W. Bauer. Deras test tar ren bakteriekultur och strimmar den på en agarplatta. Sedan placeras en liten skiva infunderad med antibiotika (lämpligen kallad en antibiotikaskiva) på agarplattan. Olika skivor med olika antibiotika placeras runt plattan, och bakterierna lämnas att inkubera under en viss tid.
När skivan har placerats på plattan börjar antibiotiken att spridas ut. Om bakterierna som studeras är känsliga för antibiotikum, kommer inga bakterier att växa nära skivan eftersom de kommer att dödas av medicinen.
Men när du flyttar längre bort från antibiotikaskivan kommer antibiotikakoncentrationen att minska. På ett visst avstånd från skivan börjar du se bakterietillväxt igen eftersom antibiotikakoncentrationen är för låg för att påverka bakterierna.
Området runt antibiotikaskivan som inte har någon bakterietillväxt kallas hämningszonen. Inhiberingszonen är en enhetligt cirkulär zon utan bakterietillväxt runt antibiotikaskivan. Ju större denna zon är, desto känsligare är bakterierna för det antibiotikumet. Ju mindre zonen är, desto mer resistenta (och därmed mindre känsliga) är bakterierna.
Hur man mäter inhibitionszonen
Förutom att namnge denna praxis och protokoll skapade forskare Kirby och Bauer också standardiserade diagram som använde diametern för inhiberingszonen för att bestämma bakteriens känslighet eller resistens mot bakterierna.
Dessa diagram kan hittas här och använder bakteriesorten, typen av antibiotika som används och zonen med inhiberingsdiameter för att bestämma om bakterierna är resistenta, mellanliggande känsliga eller mottagliga för det antibiotikumet.
Notera: Du mäter alltid inhiberingszonen i termer av millimeter.
För att mäta inhiberingszonen, placera först plattan på en icke-reflekterande yta. Ta en linjal eller bromsok som mäter i millimeter och placera "0" i mitten av antibiotikaskivan. Mät från diskens centrum till kanten av området med nolltillväxt. Ta din mätning i millimeter.
Detta mäter radie av inhiberingszonen. Multiplicera det med två för att få diametern.
Du kan också mäta direkt över inhiberingszonen från kant till kant som passerar genom mitten av antibiotikaskivan för att direkt mäta diametern istället för att mäta radien.