Innehåll
- Bättre visualisering
- Identifiering och klassificering
- Upptäckt av livskraft
- Identifiering av cellulära strukturer
Mikrobiologer studerar egenskaperna hos mikroorganismer som alger, protozoer, bakterier, svampar och virus med hjälp av ett mikroskop. Medan vissa organismer som protozoer och jästceller är lätta att observera med hjälp av ett vått fäste, kräver bakterieceller färgning. Forskare utvecklade flera metoder såsom gramfärgning, syra-snabbfärgning och fluorescerande färgning för bättre visualisering av bakterieceller och cellstrukturer. Med hjälp av sådana färgningsmetoder är det möjligt att identifiera strukturella funktioner som hjälper till att klassificera bakterier.
Bättre visualisering
Bakterieorganismer är så små att de flesta av dem är synliga endast under ett mikroskop med en förstoringseffekt på 1000X. Emellertid ger en förstoring av storleken inte en tillräcklig grad av klarhet, så att bakterier därför måste färgas före observation för att ge den tydlighet som krävs för visualisering.
Identifiering och klassificering
Färgning av bakterier för att skilja mellan bakterietyper kallas differentiell färgning. Gram-fläcken är en sådan differentiell fläck som skiljer mellan bakterier utifrån deras cellväggsinnehåll. I denna metod reagerar bakteriecellerna med en kristallviolett fläck för att ta upp en violett färg. När man lägger till ett avfärgningsmedel förlorar vissa bakterieceller färg medan andra inte gör det. När de tillfogade safraninfläcken tar de avfärgade cellerna upp fläcken så att de verkar röda medan bakteriecellerna som inte förlorade färg förblir viola. De bakterieceller som tar upp den röda färgen kallas Gram-negativa organismer och de som inte tar upp färgen klassificeras som Gram-positiva organismer. Gramfärgning ger en snabb metod för initial identifiering av bakterier involverade i infektioner. På liknande sätt hjälper den syrasnabba färgningsförfarandet att specifikt identifiera organismer som tillhör den bakterieklass som kallas Mycobacteria, såsom Mycobacterium tuberculosis.
Upptäckt av livskraft
I bakteriekulturprover är det ofta viktigt att upptäcka närvaron av levande bakterieceller. Färgningsmetoder såsom fluorescerande färgning hjälper till att identifiera om odlingsceller är livskraftiga eller inte. Levande bakterier har förmågan att omvandla 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride (CTC) -färg till ett färgämne som visar en röd fluorescens. Därför, när kulturer färgade med CTC avger sådan fluorescens, indikerar det närvaron av livskraftiga bakterier. Propidiumjodid är en fläck som endast verkar på icke-levande celler som har skadade membran, och är därför användbar för att identifiera döda bakterieceller.
Identifiering av cellulära strukturer
Färgning tillhandahåller en metod för att tydligt visualisera flera cellulära strukturer. Till exempel möjliggör Fuelgenfärgningsmetoden identifiering av kärnan i bakterieceller medan Alberts fläck är användbar för att visualisera metakromatiska granuler. På liknande sätt möjliggör silverimpregneringsmetoden identifiering av spiroketer. Flagella är lätta att observera när de är färgade med Ryus fläck. Malakitgrön färgning hjälper till att identifiera bakteriesporer.