Innehåll
Kemister använder ofta ett instrument som kallas en ultraviolett-synlig, eller UV-Vis, spektrometer för att mäta mängden ultraviolett och synlig strålning som absorberas av föreningar. Mängden ultraviolett eller synlig strålning som absorberas av en förening beror på tre faktorer: provets koncentration, c; väglängden, 1, för provhållaren, som bestämmer avståndet över vilket provet och strålningen interagerar; och koefficienten för molär absorption, e, ibland hänvisad till som den molära extinktionskoefficienten. Ekvationen anges som A = ecl och är känd som Beer's law. Ekvationen innehåller således fyra variabler, och för att bestämma någon av de fyra krävs kända värden för tre.
beräkningar
Bestäm absorbansen för föreningen vid önskad våglängd. Denna information kan extraheras från absorbansspektrum som produceras av vilket som helst standard UV-Vis-instrument. Spektra planeras normalt som absorbans kontra våglängd i nanometer. I allmänhet indikerar utseendet på alla "toppar" i spektrumet våglängderna av intresse.
Beräkna provets koncentration i mol per liter, mol / L, även känd som molaritet, M. Den allmänna ekvationen för molaritet är
M = (gram prov) / (molekylvikt av förening) / liter lösning.
Exempelvis skulle ett prov innehållande 0,10 gram tetrafenylcyklopentadienon med en molekylvikt av 384 gram per mol, upplöst och utspädd i metanol till en slutvolym av 1,00 liter uppvisa en molaritet av:
M = (0,10 g) / (384 g / mol) / (1,00 L) = 0,00026 mol / L.
Bestäm banlängden genom provhållaren. I de flesta fall är detta 1,0 cm. Andra väglängder är möjliga, särskilt när man hanterar provhållare avsedda för gasformiga prover. Många spektroskopister inkluderar banlängden med provinformationen som är redigerad på absorbansspektrumet.
Beräkna koefficienten för molabsorption enligt ekvationen A = ecl, där A är absorbans, c är koncentration i mol per liter och l är banlängd i centimeter. Löst för e blir denna ekvation e = A / (cl). Fortsätter exemplet från steg 2 uppvisar tetrafenylcyklopentadienon två maxima i sitt absorbansspektrum: 343 nm och 512 nm. Om banlängden var 1,0 cm och absorbansen vid 343 var 0,89, då
e (343) = A / (cl) = 0,89 / (0,00026 * 1,0) = 3423
Och för absorbansen av 0,35 vid 512 nm,
e (512) = 0,35 / (0,00026 * 1,0) = 1346.