Innehåll
Polymeraskedjereaktion (PCR) och dess vetenskapliga släkting, kloning av uttryckta gener, är två biotekniska genombrott på 1970- och 1980-talet som fortsätter att spela betydande roller i försöket att förstå sjukdom. Båda dessa molekylära tekniker ger forskare möjligheter att göra mer DNA på olika sätt.
Historia
Molekylärbiologen Kary Mullis revolutionerade genvetenskapen när han blev gravid av polymeraskedjereaktionen (PCR) våren 1983, vilket fick honom 1993 Nobel Prize in Chemistry. Detta genombrott kom på hälarna av kloningsforskning som går tillbaka till 1902. Inga större framsteg i kloning skedde förrän i november 1951, då ett team av forskare i Philadelphia klonade ett grodembryo. Det stora genombrottet inträffade den 5 juli 1996, då forskare klonade "Dolly" lammet från en frusen bröstcell.
PCR och kloning
Kloning är helt enkelt att skapa en levande organism från en annan och skapa två organismer med samma exakta gener. PCR gör det möjligt för forskare att producera miljarder kopior av en bit DNA inom några timmar. Även om PCR påverkar kloningstekniken genom att producera stora mängder DNA som kan klonas står PCR inför svårigheterna med kontaminering, där ett prov med oönskat genetiskt material också kan replikeras och producera fel DNA.
Hur PCR fungerar
PCR-processen involverar nedbrytning av DNA genom att värma det, vilket avlindar DNA-dubbelhelixen i separata enstaka strängar. När dessa strängar har separerats läser ett enzym som kallas DNA-polymeras nukleinsyrasekvensen och producerar en duplikatsträng av DNA. Denna process upprepas om och om igen, fördubblar mängden DNA varje cykel och ökar DNA exponentiellt tills miljoner kopior av det ursprungliga DNA skapas.
Hur kloning fungerar
DNA-kloning involverar först isolering av källan och vektor-DNA och sedan användning av enzymer för att skära dessa två DNA.Därefter binder forskare källans DNA till vektorn med ett DNA-ligasenzym som reparerar skarven och skapar en enda DNA-sträng. Det DNA introduceras sedan i en värdorganismcell, där det växer med organismen.
tillämpningar
PCR har blivit ett standardverktyg inom kriminalteknik eftersom det kan multiplicera mycket små DNA-prover för flera tester av brottlaboratorier. PCR har också blivit användbart för arkeologer att studera den evolutionära biologin hos olika djurarter, inklusive prover tusentals år gamla. Kloningsteknologi har gjort det relativt enkelt att isolera DNA-fragment som innehåller gener för att studera genfunktion. Forskare tror att pålitlig kloning kan användas för att göra jordbruk mer produktivt genom att replikera de bästa djur och grödor och också för att göra medicinska tester mer exakta genom att tillhandahålla testdjur som alla reagerar på samma sätt på samma läkemedel.