Innehåll
Forskare och forskare studerar bakterietillväxt genom att förbereda kulturer i ett laboratorium. Petriskålar som innehåller näringsämnen agar odlar bakteriekulturer från en enda svepa eller ympning. Studenter kan förbereda näringsämnen hemma med hjälp av livsmedel från livsmedelsbutiker eller hälsokostbutiker för ett vetenskapsmässigt projekt. Konventionella köksapparater och grundläggande köksutrustning ger verktygen för att förbereda ett sterilt odlingsmedium som kan dispenseras i petriskålar. Genom att följa sterila tekniker genom att värma upp materialen och hålla ytorna rena och torra kommer resultaten att förbättras genom att förhindra att mögel och partiklar förorenar kulturen.
Placera ett kaffefilter i en sil och hänga silen över öppningen på den klara skålen.
Häll långsamt buljongen i filtret och se till att buljongen inte flyter över från sidorna på filtret. Om filtret blir igensatt med partiklar, ta bort det använda filtret, byt ut med ett rent filter och fortsätt att hälla buljongen.
Ta bort silen och filtrera från toppen av skålen och se om buljongen verkar klar (dvs det finns inga suspenderade partiklar i vätskan). Om partiklar flyter i vätskan, upprepa steg 1 och 2 med en andra klar skål och ett nytt kaffefilter.
Placera potten på kaminen och häll den klara buljongen i potten.
Tillsätt 16 uns destillerat vatten i potten som innehåller buljongen.
Sätt på kaminen och justera värmen till medium-låg. Värm buljongen till att sjuda (det vill säga små bubblor visas nära sidan av potten).
Tillsätt 1 tesked av agar-agarpulvret i den sjunkande buljongen (cirka 2,5 gram) och rör om blandningen tills pulvret är löst. Se till att röra om pulvret för att lösa upp och förhindra att gelatinet sjunker till botten av potten (där det kan brinna).
Upprepa steg 7 tills allt agar-agarpulver har lösts i buljongen.
Fortsätt att omröra buljongen i cirka 1 minut för att säkerställa att allt pulver är helt upplöst.
Stäng av ugnen, placera locket på potten och låt vätskan svalna i minst 15 minuter.
Ordna de sterila petriskålarna i rad för enkel montering, men ta inte bort locken. Om det är önskvärt, placera en trivet för att hålla den varma potten. Om du använder lock med vaniljsås i stället för petriskål, steriliserar vaniljsåsarna genom att placera kopparna och locken inverterade (upp och ner) på ett folietäckt kakark och baka i ugnen i minst en timme vid 375 grader Fahrenheit. Se till att de steriliserade kopparna och locken är helt kylda före användning.
Vidrör försiktigt utsidan av potten för att kontrollera att den är varm vid beröringen och placera potten på trivetten. Om potten är för varm att röra vid, vänta minst 10 minuter för att låta potten svalna.
Ta bort locket och sätt åt sidan. Placera sleven i potten.
Ta bort locket från en petriskål och fördela näringsbuljongen för att fylla skålen halvvägs. Täck skålen omedelbart med locket.
Upprepa steg 14 för varje petriskål.
Låt näringsbuljongen stelna i petriskålen i minst 1 timme, ostörd.
Skaka försiktigt petriskålen sida vid sida för att kontrollera att näringsbuljongen har stelnat fullständigt. Om buljongen inte är helt gelade, vänta ytterligare 20 minuter innan du kontrollerar igen.
Täck ett bord eller en plan yta med en rulle pappershanddukar för att skapa ett sterilt arbetsområde. Riv av ett ark med pappershandduk och vik det fyra gånger för att skapa en tjock, rektangulär trasa. Ställ in denna wad i ena änden av arbetsområdet.
Överför en petriskål till det sterila arbetsområdet och ta bort locket. Vänd försiktigt skålen och lägg den ena änden på sidan av den vikta vadden, så att den ligger omvänt och lätt vinklad (med ett litet gap mellan pappershandduksduken).
Vänd locket och placera det ovanför petriskålen på den sterila arbetsytan. Om det finns vattendroppar på locket, skaka försiktigt bort fukten innan du placerar den på den täckta ytan, men vidrör inte lockets insida.
Upprepa steg 19 och 20 för varje petriskål och placera en sida av den inverterade skålen på sidan av den föregående skålen snarare än pappershanddukskivan. Diskarna kommer att visas som en förskjuten uppsättning, med luckor på ena sidan så att överskottsfuktighet kan avdunsta.
Titta på de inverterade petriskålarna för att kontrollera om fukten på sidorna på plattorna förångades. När all fukt har rensats, vrid plattorna höger upp och täck omedelbart med locken för användning.
Inokulera näringsagaren på plattan genom att torka av en svamp som innehåller den önskade kulturen på näringsagarytan innan du täcker med locket. Vänd petriskålen så att det fasta materialet är ovanpå. Förvara den inokulerade petriskålen med det fasta ämnet för odling och locket på botten för att fånga fukt, lösa partiklar eller tillväxt.