Innehåll
Kromatografiska tekniker utförs i vetenskapliga laboratorier för att separera kemiska föreningar från ett okänt prov. Provet löses i ett lösningsmedel och flödar genom en kolonn, i vilket det separeras genom föreningens dragning mot kolonnens material. Denna polära och icke-polära attraktion mot kolonnmaterialet är den aktiva kraften som får föreningarna att skilja sig över tid. De två typerna av kromatografi som används idag är gaskromatografi (GC) och högpresterande vätskekromatografi (HPLC).
Mobil transportfas
Gaskromatografi förångar provet och det transporteras längs systemet av en inert gas såsom helium. Att använda väte ger bättre separering och effektivitet, men många laboratorier förbjuder användning av denna gas på grund av dess brandfarliga natur. Vid användning av vätskekromatografi förblir provet i sitt flytande tillstånd och skjuts genom kolonnen under högt tryck av olika lösningsmedel såsom vatten, metanol eller acetonitril. Olika koncentrationer av varje lösningsmedel kommer att påverka kromatografin för varje förening på olika sätt. När provet förblir i sitt flytande tillstånd ökar föreningens stabilitet.
Kolumntyper
Gasskromatografikolonner har en mycket liten inre diameter och deras längd kan variera från 10 till 45 meter. Dessa kiseldioxidbaserade kolumner rullas upp längs en cirkulär metallram och värms upp till en temperatur av 250 grader Fahrenheit. Flytande kromatografikolonner är också kiseldioxidbaserade men har ett tjockt metallhölje för att motstå stora mängder inre tryck. Dessa kolumner arbetar under rumstemperatur och sträcker sig från 50 till 250 centimeter i längd.
Föreningstabilitet
Vid gaskromatografi förångas provet som injiceras i systemet vid cirka 400 grader Fahrenheit innan det bärs genom kolonnen. Följaktligen måste föreningen kunna motstå värme vid höga temperaturer utan att bryta ner eller brytas ned i en annan molekyl. Flytande kromatografiska system gör det möjligt för forskaren att analysera större och mindre stabila föreningar eftersom provet inte utsätts för värme.