Kalibreringskurvor används för att bestämma koncentrationen av okända ämnen baserat på tidigare mätningar av lösningar med kända koncentrationer. Mätningens precision och noggrannhet är beroende av kalibreringskurvan. Ju bättre kurva desto mer exakt svaret, desto sämre kurva desto sämre noggrannhet. Detta är en typ av jämförelsemetod, den okända jämförs med en känd.Kalibreringskurvor används för alla typer av mätningar med många olika maskiner. Detta exempel använder en spektrofotometer.
Späd standardlösningen till olika koncentrationer. Det är typiskt att göra en 10 gånger utspädning, 20 gånger utspädning, 30 gånger utspädning eller någon annan stegvis lösning. Gör varje utspädning två gånger så att alla prover är i duplikat.
Beräkna koncentrationerna av de utspädda lösningarna. Ett exempel på den nya koncentrationen för den tio gånger utspädningen skulle vara koncentrationen av den första lösningen multiplicerad med 0,10.
Läs absorptionsförmågan hos de utspädda lösningarna på spektrofotometern. Sätt i en kyvett i spektrofotometern så att triangelmarkeringen står i linje med ljusbanan. Stäng locket på spektrofotometern och tryck på nollknappen. Nollställ maskinen med destillerat vatten var femte prov. När maskinen har nollställts läs proverna på samma sätt. En skillnaden är att du trycker på enter för att få absorptionsförmågan. Tryck på enter när du har stängt locket. Spela in dessa värden i en anteckningsbok.
Grafer absorbansen mot de beräknade kända koncentrationerna för alla prover. Den kända koncentrationen är på X-axeln och absorptionsförmågan på Y-axeln. Det är bäst att skapa grafen i ett datorgrafikprogram.
Använd grafprogrammet för att beräkna regressionslinjen för de grafiska punkterna. Det är möjligt att ta bort en av de två punkterna för varje utspädning för att få den bästa regressionslinjen. Detta är poängen att göra varje utspädning i duplikat. Ju närmare R ^ 2-värdet är ett, desto bättre är regressionslinjen. Notera regressionslinjeekvationen.
Läs absorptionsförmågan hos den okända koncentrationslösningen på spektrofotometern. Registrera denna absorptionsförmåga.
Beräkna koncentrationen av den okända lösningen med hjälp av regressionslinjeekvationen. Den okända absorptionsförmågan är substituerad som Y i ekvationen. Du löser ekvationen för X, koncentrationen.